01 菌株的(de)種屬鑒定與基因組功能注釋
基于生理(lǐ)與生化實驗的(de)一(yī)系列結果及16S rRNA的(de)分析,菌株被歸屬到假單胞菌Pseudomonas。選取屬內(nèi)代表菌株,基于全基因組分析結果,被分類到Pseudomonas mosselii (圖1A)。對P.mosselii 5(3)二代測序,組裝得到的(de)基因組全長(cháng)5,676,241 bp,GC含量64.38%。菌株P.mosselii 5(3)含有5134個基因,其中56.8%的(de)基因功能能被KEGG數據庫注釋,尤其是外源物質生物降解與代謝“Xenobiotics biodegradation and metabolism”這個分類中有超過60個功能基因,它們主要參與降解各種芳香族化合物(乙苯、硝基甲苯、二甲苯、苯乙烯、萘、多環芳烴、氨基苯甲酸酯、二惡英等)。此外,在基因組中還發現了可(kě)能參與全氟羧酸脫羧和(hé)脫羰基化的(de)酶的(de)編碼基因,如(rú)參與氟化物脫鹵過程的(de)鹵烷脫鹵酶基因(dhaA)和(hé)鹵乙酸脫鹵酶H-1基因(dehH1)。
02 在C7-C10全氟羧酸生長(cháng)表現
細菌為(wèi)了在全氟羧酸上生長(cháng),需要将其運輸到細胞中,合成一(yī)種能夠斷裂C-F鍵的(de)高(gāo)效酶,并識别有毒的(de)氟離(lí)子(zǐ),随後将其從細胞中排出。本研究發現:以上的(de)障礙對于P.mosselii 5(3)都不是問題,因為(wèi)它能夠在以C7-C10 全氟羧酸作為(wèi)唯一(yī)碳源的(de)礦物培養基上良好生長(cháng),而6-7天後,其生物量達到峰值。
03 解析C7-C10全氟羧酸的(de)降解途經
全氟羧酸的(de)生物降解可(kě)能包括多個步驟:脫羧、羟基化和(hé)脫氟。LC-MS檢測了菌株以全氟羧酸為(wèi)碳源生長(cháng)的(de)培養液的(de)代謝物,采用離(lí)子(zǐ)交換色譜檢測氟離(lí)子(zǐ),并結合基因組中編碼參與脫羧、羟基化和(hé)脫氟反應的(de)酶,繪制出下圖所示的(de)生物降解途徑。
1. 菌株P.mosselii 5(3)分離(lí)自(zì)殺蟲劑污染的(de)土壤,首次報道(dào)了它能降解C7-C10全氟羧酸。
2. 菌株的(de)基因組測序發現了之前未在微生物中報道(dào)的(de)基因,包括氟化合物降解關鍵的(de)酶或蛋白,如(rú)鹵烷脫鹵酶基因、鹵乙酸脫鹵酶H-1基因、氟離(lí)子(zǐ)轉運基因和(hé)烷磺酸單加氧酶基因。
3. LC-MS分析結果表明,轉化是由全氟己酸引起的(de),伴随氟離(lí)子(zǐ)的(de)釋放。
4. 菌株P.mosselii 5(3)在分子(zǐ)層面上證實具有分解C7-C10 全氟羧酸的(de)高(gāo)潛力,該項研究将有助于探索菌株在降解全氟羧酸的(de)細胞生物學(xué)過程和(hé)相關生物技術的(de)開發,以恢複受有機氟化物污染的(de)環境。
Chetverikov S, Hkudaygulov G, Sharipov D, et al. Biodegradation Potential of C7-C10 Perfluorocarboxylic Acids and Data from the Genome of a New Strain of Pseudomonas mosselii 5 (3)[J]. Toxics, 2023, 11(12): 1001.